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invention
Fédération de Russie Patent RU2092547

méthodes de procédés microbiologiques, la croissance des plantes et des cellules végétales activation

Méthodes d'activation des processus microbiologiques,
La croissance des plantes et des cellules végétales

Nom de l'inventeur:. Vinarov AY; Ipatova TW. Mirskova AN. Levkovskaya GG
Le nom du titulaire du brevet: Institut national de recherche pour la biosynthèse des protéines
Adresse de correspondance:
Date de début du brevet: 11.01.1995

Utilisation: l'industrie microbiologique, l'agriculture - culture. Le procédé selon l' invention pour activer les processus de croissance des plantes microbiennes et des cellules végétales consiste à introduire dans le milieu de croissance pour les micro - organismes ou activateur de cellules végétales, qui est utilisé comme un mélange des trois composés chimiques appartenant au groupe de sels d'ammonium, l' acide arylacétique de formule générale C 6 H 4 R 1 · R 2 est C 2 H 2 O 2 · NH · C 6 H 15 O 3, dans laquelle R 1 = H, Cl, CH 3; R 2 = O, S, SO 2, prise dans le rapport de 10,1: 10,1: 10,1 mélange d'une quantité totale de 1,0 x 10 -10 à 1,0 x 10 -1 g par 1 g de réception ou le traitement de la biomasse. Ledit promoteur peut être utilisé pour le traitement du sol ou de la végétation dans l'usine de traitement.

DESCRIPTION DE L'INVENTION

L'invention se rapporte au domaine de la biotechnologie, au moyen de procédés microbiologiques , en présence de cellules microbiennes actives, ainsi que les processus d'accumulation de la biomasse des cellules végétales in vitro. Il peut également être utilisé dans des plantes cultivées pour accélérer la maturation des fruits et augmentation de rendement.

Comme cela est connu, le principal inconvénient de ces deux procédés microbiologiques et des processus d'accumulation de tissus végétaux est leur relativement (par des procédés chimiques), le faible taux d'occurrence dans le temps. Ce fait est expliqué par le développement de multiples façons d'activer ces processus avec une variété d'additifs, des promoteurs, des activateurs, qui augmentent leur vitesse. En tant que stimulants peuvent être utilisés comme substances individuelles de diverses natures, telles que des vitamines, des acides aminés, des acides carboxyliques, des micro-nutriments, des tensioactifs, des bases puriques ou pyrimidiques, etc. et des mélanges de composition complexe.

Ainsi procédé connu pour la culture de Pichia genres de levure, Saccharomyces, Zygosaccharomyces, Candida et Torulopsis sur des milieux contenant des hydrocarbures, des alcools ou des acides organiques, dans lequel le procédé microbiologique d'activateur en utilisant un bouillon de culture obtenu après culture de micro-organismes: Les représentants des genres Candida, Torulopsis, Trichosporon, Rhodotorula et Cryptococcus (brevet japonais N 54-19462, C 12 C 11/08 (36 (3) B II), 1979). Lors de l'ajout de 0,1 à 10,0% du fluide de culture dans le milieu de croissance de croissance microbienne de la biomasse observée de 7-30% et l'augmentation du rendement en biomasse de 5 à 15%, cependant, la croissance active des micro-organismes doit être utilisé en même temps que l'activateur de croissance (bouillon de culture) de milieu de culture des médicaments coûteux enrichis tels que les vitamines: la biotine, pantothénate de calcium, acide folique, l'inositol, l'acide aminobenzoïque, la pyridoxine, la riboflavine, la thiamine. Ce fait est le principal inconvénient de cette méthode puisque l'utilisation de médicaments coûteux dans la composition du milieu de culture de microorganismes qui se développent presque réel dans la mise en oeuvre industrielle du procédé.

Connu et un procédé pour accélérer la croissance des micro-organismes (brevet US N 4997765, Cl. C 12 R 1/19, 1991), comprenant la culture des micro-organismes du groupe des bactéries, des levures et des champignons sur le milieu de culture contenant le saccharide dans le groupe constitué par les sucres, l'amidon, la cellulose . Mercredi et contient un stimulateur de la croissance exogène du groupe de l'acide picolinique et ses sels en concentrations stimulatrices 400 ng / ml de milieu. Le principal inconvénient de cette méthode est le champ d'application limité. La méthode est utilisée uniquement dans les procédés microbiologiques qui sont utilisés comme une source nécessaire à la croissance des micro-organismes, le saccharide dans le groupe constitué par les sucres, d'amidon et la cellulose carbone.

Dans un autre analogue (SU, URSS N 1761058, Cl. A 01 M 4/00, C 12 N 04/05, 1990 "Procédé de production de fibres de coton») pour la culture de cellules de fibres de coton comme un stimulateur du procédé est introduit dans le milieu de culture l'acide férulique et gibbérellique à une concentration de 0,1 mg / l chacun, de sorte que les fibres de masse augmente de 4 fois. L'inconvénient de cette méthode est la portée limitée du processus de l'activateur.

large spectre Un procédé est connu du métabolisme cellulaire traite activateur (demande internationale PCT (WO) N 90/03430, Cl. C 12 N 5/00), dans lequel pour améliorer la croissance, la productivité et l'augmentation de la durée de la culture cellulaire en utilisant un milieu de culture contenant besproteinovye des additifs consistant en composants synergiques, et un supplément exempt de sérum et de sérum, qui sont des composants majeurs de la glutamine ou le glutamate, le tryptophane, les précurseurs des phospholipides, par exemple la choline et l'éthanolamine. Le principal inconvénient de cette méthode est que l'activateur présente un multi-composants, la stabilité stricte qui ne peut être satisfaite en raison de la nature de l'activateur (activateur est le produit d'origine biologique, et la manière dont un tel produit sans isolement préalable et la purification de composés chimiques individuels fluctuantes composition de composants). L'instabilité de la composition entraîne nécessairement l'instabilité proposée propriétés activatrices.

L'utilisation de stimulants (activateurs) dans la plante pour activer les fonctions vitales des plantes est encore moins largement utilisés que pour l'activation de l'activité des cellules. Cependant, un nombre suffisant de méthodes similaires.

Comme une méthode connue de la culture des cultures maraîchères (brevet RF N 1792282 A3, cl A 01 N 65/00, 1993.), Qui consiste à traiter une solution aqueuse de régulateur graines germes de croissance. Afin d'améliorer la qualité du produit et la production en tant que régulateur de croissance utilisé un extrait acellulaire de la fougère aquatique Azolla pinnata à une concentration de 0,5 à 1 g / l. Le traitement dirigé par le trempage des graines dans une solution aqueuse d'extrait, pulvériser les plantes avec des plants de la plantation d'un escrime lors lieu permanent et la floraison. À la suite de complexes variétés transformation de tomates "Alpatevka 905 et« rendement augmenté de 52,8% Les principaux inconvénients de cette méthode sont, d'une part, l'absence d'un effet stimulant sur la période d'affinage, et, d'autre part, à base de matières premières limitées lorsque le stimulateur son débit relativement élevé par plante.

Le problème technique qui a fait face par les inventeurs de choisir une méthode universelle d'activer les processus biologiques utilisés dans la biotechnologie et l'amélioration des plantes, dans ce cas utilisé dans l'activateur de processus doit avoir une nature chimique, qui assure la stabilité d'une composition donnée de l'activateur, ainsi, et doit être préparé d'une manière simple à partir de matières premières facilement disponibles et pour la mise en oeuvre du procédé à l'échelle industrielle pour être utilisé à faibles doses.

Ce problème technique est résolu par la fourniture d' un activateur biologique du procédé, qui est un mélange de trois composés chimiques appartenant au groupe de sels d'ammonium d'acides arylacétiques de formule générale C 6 H 4 R 1 .R 2 C 2 H 2 O 2 · NH · C 6 H 15 O 3, R 1 H, Cl, CH 3; R 2 -O, -S, -SO 2, pris dans le rapport de 0,1 à 10 0,1 à 10 0,1 à 10 mélange en une quantité totale de 1,0 x 10 -10 à 1,0 x 10 -1 g pour 1 g du récepteur de l'activateur ou le traitement de la biomasse. intervalles choisis rapports des composants dans le mélange et la quantité totale d'un mélange de 1 g pour le traitement reçue ou de la biomasse traitée déterminée expérimentalement. expériences spéciales ont montré que la quantité totale de la production de l'activateur au-delà d'une plage prédéterminée ou non le processus d'activation est observée ou l'inhibition se produit dernier, ou à la sortie au-delà de la limite supérieure de l'intervalle pour augmenter le taux de l'activateur de flux est impraticable parce elle ne conduit pas à une augmentation supplémentaire de l'activation. Au moment de quitter la portée des composants ci-dessus dans les rapports des intervalles de mélange n'a pas été augmenté processus d'activation par rapport aux procédés analogues de l'activation.

Le résultat technique de l'invention est activé, à savoir augmentation de la productivité de tels procédés biologiques comme la prolifération cellulaire, l'accumulation de la masse cellulaire et des produits métaboliques de la reproduction moyen de micro-organismes, la consommation alimentaire, la libération des cellules dans l'environnement des composants cellulaires, l'amincissement et les membranes cellulaires de rupture, la maturation des plantes, et le résultat de l'activation obtenir stable . Un résultat technique supplémentaire de l'invention est également une plus large gamme d'activateurs de procédés microbiologiques, les processus de croissance des plantes et de leurs cellules, et les produits chimiques utilisés dans le mélange d'activation est préparé par un diagramme de flux de processus simple et leur synthèse maîtrisé par l'industrie nationale. Tous les composants inclus dans la composition du mélange testé pour la toxicité à l'Institut médical d'Etat d'Irkoutsk. Lorsque les médicaments LD intrapéritonéale 50 est dans la gamme 1000-1599 mg / kg, ce qui peut être attribué à une classe, les composés de ces substances essentiellement non toxiques. L'autorisation est accordée par les autorités compétentes sur leur application industrielle.

Ce résultat est atteint grâce au fait que le processus biologique de fabrication d'un mélange de trois composés chimiques individuels, dont chacun a un certain effet spécifique sur la cellule vivante et l'effet de chacune d'entre elles se complètent mutuellement. En conséquence de ce phénomène, - l'apparition d'un effet synergique, ce qui se traduit par une variété de processus biologiques. Ainsi, pour un processus biologique particulier sur la base des propriétés individuelles des composés déjà connus sélectionnés combinaison de trois composants dans un rapport spécifique des substances définies et le montant total du mélange, calculé par gramme de biomasse obtenu ou transformés. Etant donné que chaque procédé biologique en utilisant un mélange d'activation d'une composition bien définie et la quantité, le résultat de l'activation ne sont pas soumis à des fluctuations au cours du processus de lecture.

Procédé d'activation est effectuée en introduisant dans le milieu qui coule dans l'activité des micro-organismes ou des cellules de tissus végétaux, le mélange d'activation sous la forme d'une solution aqueuse ou alcoolique, à différents stades de bioprocédé. En utilisant le procédé d'activation d'un mélange de végétaux est introduit dans une solution nutritive, qui est traitée avec des semences, des plantes ou le sol ou l'on prépare un matériau de remplissage à base telle que du sable, de tourbe, d'une teneur donnée du mélange d'activation et ce matériau est traité pour fertiliser le sol.

Le procédé peut être utilisé dans la fabrication de divers additifs alimentaires produits par voie microbiologique, comprenant et par bioconversion de matières premières végétales dans les procédés de biosynthèse de divers produits chimiques, tels que l'alcool éthylique, l'acide citrique, etc. processus dans divers milieux de nettoyage de contaminants chimiques dans le processus de plasmolyse et autolyse des micro-organismes, et dans les installations et dans la masse de la production de semences et de transformation.

Voici des exemples de l'utilisation de divers processus biologiques activés par la méthode proposée, la portée du procédé ne se limite pas à ces exemples.

Exemple 1: Préparation de la protéine-vitamine concentré (IOO). Fermentation scène.

Procédé selon analogique

La souche de levure p.Candida maltosa VSB-779 (VKPM Y-196 N) est cultivé en continu dans la machine avec un volume de travail de 5 litres, sous agitation mécanique et l'aération de l'air moyenne. Comme source de carbone utilisée paraffines liquides purifiées, consistant en n-alcanes en C 13 -C 23 (non inférieure à 97%). La culture est effectuée dans un milieu nutritif de la composition, en g / l suivant: 0,9 de l'acide orthophosphorique; chlorure de potassium, 1,1; Le sulfate de magnésium 0,8; sulfate de fer 0,15; le sulfate de zinc 0,03; sulfate de manganèse 0,03; N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy 1,0 x 10 -5. Procédé de culture est effectuée à une température de 32-34 ° C et à un pH de 4,0-4,2, la concentration en paraffine dans le milieu de 3,2. et le taux de change moyen de 0,33 h -1. La productivité du procédé est de 9,8 kg / m 3 · h, le rendement de biomasse à partir d' une source de carbone de coûts des matières premières 121% de la formation de 1 kg 0,826 kg de biomasse. Le produit contient 54% de protéines et de vitamines en une quantité, en g / g: B 2 50; B 6 6; PP 300; stérols 0,28.

La méthode proposée

La souche de levure C. maltosa VSB-779 est cultivé dans les mêmes conditions le même milieu, en utilisant comme matière première les mêmes que les paraffines d'une manière analogue. Mais au lieu d' un milieu de culture dans la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy à une concentration de 1,0 × 10 -5 g / l activateur est administré, consistant en un mélange de N-tris (2-hydroxyéthyl) ammonium , sel 2 l'acide -hlorfeniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 1: 1: 1, en une quantité de 1,0 x 10 -5 g / g de levure. La culture est effectuée à une concentration de cire dans le moyen de 3,2. et le taux de change moyen de 0,30 h -1. Performance du processus est de 10,2 kg / m 3 · h, le rendement de la biomasse à partir de la source de carbone 125% des coûts des matières premières sur la formation de 1 kg de biomasse de 0,800 kg.

Un produit contenant 63% de protéines et de vitamines, ug / g: B 2 200; B 30 Juin; PP 1500; stérols 0,52.

Application du procédé d'activation lors de la production d'un concentré de protéines vitamine permet d'augmenter la productivité du procédé et de 4-16% en vitamines 2-5 fois, tout en réduisant le débit d'écoulement de charge d'alimentation de 4% par rapport à la même méthode.

Exemple 2: Le processus d'obtention de protéines vitamine concentré (IOO). Etape plasmolyse.

Le procédé de la plasmolyse de la levure dans la production de masse de la seconde étape est IOO décanter microbienne séparation de la biomasse de la boucle de suspension à partir du liquide de culture. Conditions de plasmolyse affectent la qualité du produit fini.

Procédé de commande

Dans ce procédé, la suspension obtenue après culture de fermentation de la levure Candida maltosa VSB 779 est concentrée par décantation puis est soumise à un chauffage progressif sous agitation à une température de 90 ° C, maintenu à cette température pendant 60 min, puis la biomasse inactivée a été refroidi à 50-60 ° C, résidus séparés séparation de liquide de culture et on les sèche. Un produit sec contenant de l'humidité, 6,2; cendres 5,5; 7,5 acide nucléique; hydrates de carbone 19,5; lipides 9.0; des hydrocarbures 0,7; protéine brute 59,0; protéines vraies 46,9.

La méthode proposée

Par cette méthode, a reçu la même suspension de levure telle que celle du procédé de commande, concentrée par décantation et le mélange épaissi est la biomasse N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide feniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyle), le sel d'ammonium de l'acide 2- ajouté acide hlorfeniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l' acide 2-hlorfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 0,1: 10: 10, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -1 g / g de levure. Puis épaissie progressivement la biomasse , tout en agitant on chauffe à 90 ° C et immédiatement refroidie à 50-60 ° C, on sépare et on sèche. Un produit contenant de l'humidité, 6,9; cendres 5,5; acide nucléique, 7,7; hydrates de carbone 20,5; lipides 9.4; 0,2 hydrocarbures; protéine brute 62,5; protéines vraies 53,1.

Ainsi, l'application de la méthode proposée pour le processus d'activation permet d'obtenir des produits plasmolyse de la levure préparée avec une teneur élevée en composants essentiels tels que des glucides et des protéines vraies.

Exemple 3. Préparation de la levure de boulanger.

Procédé selon analogique

p.Saccharomyces de levure course cerevisiae 14 est cultivé à l'installation à 10 litre de milieu de la composition, g / l suivant: mélasse (basé sur la teneur en sucre de 46%) 39,4, le sulfate d'ammonium 2,76; le phosphate de diammonium, 0,6; MOP 0,7; N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy 1,0 x 10 -5. La levure cultivée dans le profil de l' air d' alimentation en air de 6 heures à 30 ° C, pH 4,6-5,1. Pour l'ajustement du pH, on ajoute du carbonate de potassium. La dilution finale de la mélasse 1/22. Dans ces conditions , le taux de croissance spécifique de 0,169 h - 1, l'accumulation de la biomasse 66,7 g / litre de levure pour donner 93,7 mélasse de poids.

La méthode proposée

p.Saccharomyces de levure course cerevisiae 14 est cultivé dans les mêmes conditions et le même milieu que dans l'exemple 1, mais au lieu du milieu de culture N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy ajouté complexe stimulant constitué par de la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl) ammonium, un sel d'acide hlorfeniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide hlorfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 0,1: 0,1: 10, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g de levure. Dans ce processus, les indicateurs suivants: taux de croissance spécifique de 0,175 h -1, l' accumulation de biomasse de 70,5 g / l, de la mélasse de levure sortie à 99,1 en poids.

L'utilisation de la méthode d'activation au cours de la production de levure augmente les paramètres clés du procédé de panification à 6% par rapport à la même façon.

Exemple 4 : Préparation de fourrage levure résineux hydrolysat.

Procédé de commande

Levure, p. Candida souche K-25 scottii d (N VKPM Y-521) ont été cultivées dans des conditions continues dans une machine avec un volume de travail de 5 litres. Hydrolysat de la matière première végétale est neutralisée avec de l' oxyde de calcium à une température de 85 ° C à pH 3,5 et filtré. Ensuite , ajouter des composants minéraux à l' azote et la concentration en phosphore dans le milieu, respectivement, en mg / l: 798 et 600. Ensuite, on neutralise avec de l' ammoniaque à un pH de 4,2, purgé avec de l' air à 45 ° C pendant une heure et on filtre. Ensuite , le milieu nutritif a été ajouté le sel N-tris- (2-hydroxyéthyl) ammonium de l' acide 4-hlorfenilsulfoniluksusnoy en une quantité de 1,3 x 10 -4 g / l. La culture de la levure est effectuée dans des conditions d'écoulement du milieu nutritif à 0,24 h -1 appareil d'aération d'air avec maintien automatique de la température de 39 ° C et à un pH de 4,2-4,4. La quantité initiale de sucre consommé des substances réductrices (PB) dans le milieu de culture est de 1,3% de rendement biomasse de levure de la matière première (en termes de PB) est égale à 68,2%

La méthode proposée

Levure, p. sc Candida. cultivées dans les mêmes conditions et sur le même support que dans la méthode d'essai, mais au lieu de la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide administré 4 hlorfenilsulfoniluksusnoy complexe activateur consistant en N-tris (2-hydroxyéthyl) les sels d'ammonium de l'acide 2-hlorfeniloksiuksusnoy, sel de N-tris (2-hydroxyéthyl) ammonium de l'acide 2-metilfeniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l'acide 2-metilfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 0,1: 10: 1,0, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -4 g / g de levure. rendement Levure de la biomasse de RV dans ce mode de réalisation est de 79,3%

Le processus d'activation de la production de levures fourragères hydrolyse de la méthode proposée permet d'augmenter le rendement de 16% par rapport à la méthode de contrôle.

Exemple 5 Le procédé de purification de liquide flux hydrolyse production de fourrage de levure.

Procédé de commande

Le raffinage est soumis posledrozhzhevaya barde. Barda après cuves de fermentation servis dans biookislitel, qui nettoient en permanence, il culture du champignon Trichosporon cutaneum (souche de production Tulun GB). Bard vient au contenu, mg / l: COD 6050; DBO 5, 3200; azote total 140; 45 phosphore; pH 4,0. Dans le processus d'accumulation de la culture de la biomasse du champignon consomme le sel, le sucre restant, les composés de carbone oxydés. A la sortie, à partir d'une suspension épaisse biookislitelya biomasse fongique Trichosporon c. contenant, mg / l: 22000 masse cellulaire; COD 3500; DBO 5 1950; 67 l'azote; 28 phosphore; pH 5,7. La masse cellulaire a été séparée, ajoutée à un produit alimentaire, un courant de liquide admis à circuler filtration.

La méthode proposée

Selon le projet de purification procédé de vinasse posledrozhzhevoy le procédé de commande est réalisée de manière similaire, mais biookislitel avec un mélange vinasse a été introduit en continu de N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l'acide 2-metilfeniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de 4-metilfeniltiouksusnoy acide N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-metilfenilsulfoniluksusnoy dans le rapport 10: 10: 0,1, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -9 g / g du champignon. La production d'une suspension de la biomasse fongique Trichosporon c. contenant, mg / l: 28000 masse cellulaire; COD 2840; BOD mai 1850; azote 10,0; 0.0 phosphore; pH 6,2. La masse cellulaire a été séparée, ajoutée à un produit alimentaire, un courant de liquide admis à circuler filtration.

Ainsi, l'application de la méthode pour activer le liquide de nettoyage des flux de production de fourrage hydrolytique levure peut réduire la teneur en contaminants en moyenne 50% et avec un produit en outre de recevoir 27% de plus que la méthode de contrôle.

Exemple 6 Préparation de l' alcool éthylique à partir du bois d' hydrolysat.

Procédé de commande

L'hydrolysat concentré a été dilué à la teneur en bois tendre de sucres réducteurs de 3,5% superphosphate ajouté en une quantité de 0,3 g / l et du sulfate d'ammonium en une quantité de 0,15 g / l, on neutralise avec du lait de chaux est chauffée à un pH de 5,5, on filtre et rendre à l'unité intérieure, qui présente un tube d'évacuation des produits gazeux du métabolisme. Il font également la levure p. Saccharomyces vinii, Race T-8 en une quantité de 5 g / l. La fermentation des sucres est effectuée à une température de 32 ° C pendant 4 heures. A la fin de l'expérience , mesurer la quantité de dioxyde de carbone généré, l' éthanol et la quantité résiduelle de substances réductrices (PB). Dans ces conditions, le rendement du procédé de l'éthanol à partir de 100 g de sucre fermenté 51,8 ml, soit. E. 80% de la théorie (64,8 mL par 100 g PB), la quantité de dioxyde de carbone libéré est de 30,1 g, le PB résiduel 12 g / l.

La méthode proposée

La production d'éthanol à partir hydrolysat d'oeuvre est réalisée par la méthode de régulation, mais au début d'un moût hydrolytique, après filtration, fait activateur consistant en la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-metilfeniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl ) feniltiouksusnoy sel d'ammonium de l' acide et de N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d' acide fenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 10: 0,1: 0,1, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g d'alcool. Dans ce cas, les paramètres de processus suivants sont le lieu: alcool donné 100 g de sucre fermenté 60,8 ml, soit 94% de la théorie et de 17,4% plus élevé que dans le processus de contrôle; la quantité de dioxyde de carbone produit 24,2 g; 0,2% PB résiduel qui est 83% plus faible que dans le procédé de contrôle.

Exemple 7 Préparation de l' acide citrique.

Procédé de commande

Le procédé de production d'acide citrique est effectuée par mise en culture submergée de la culture du champignon Aspergillus Niger (N VKPM Y-228) dans un appareil de traitement par lots au moyen d'agitation avec un agitateur mécanique et d'air introduit dans la machine. Synthèse de l'acide citrique comme suit. Le bouillon contenant de la mélasse purifiée de sel de ferrocyanure et ses sels: chlorure d'ammonium, du phosphate dibasique de potassium, les sulfates de magnésium et de zinc, inoculé avec les spores du champignon Aspergillus Niger et micro - organismes accumulent la biomasse à une température de 30-32 ° C dans un ballon à bascule à 280 tr / min 4 jours. travail de la mélasse de solution de volume directement dans le fermenteur stérilisé de 12 litres contenant 3% de mélasse de sucre et de manière aseptique dans le fermenteur se compose des solutions stériles de chlorure d'ammonium, le phosphate disodique et les sulfates de potassium, de sels de magnésium et de zinc, mais aussi zasevnuyu biomasse fongique en une quantité de 2 5 l. pH initial du milieu nutritif dans le fermenteur est de 4,0 à 4,3. biosynthèse de l' acide citrique est effectuée sans régulation de pH alcalins ou acides réactifs à 31-32 ° C, l' aération du milieu égal à 0,2 au 0,5 l / l · min, une surpression de 0,2 à 0,4 kPa, et une vitesse d'agitateur 50-150 tr / min. Après avoir atteint un pH de 3,0-3,2 commencent Appareil d'alimentation dans une solution concentrée de la mélasse en portions jusqu'à ce que la concentration de la solution de celle-ci (sucre) dans un milieu de 150 g / l (sur la base de l'ensemble de l'appareil présenté dans la mélasse). A l'issue du processus est jugé par la diminution de la teneur en acide citrique après le maximum de son accumulation. La concentration finale de l' acide citrique dans le procédé de temps égal à 168 heures est de 97,5 g / L, avec un rendement d' acide citrique à 65% d' élimination moyenne de 1 m 3 d'acide est égal à 13,9 kg / m 3 · jour.

La méthode proposée

Le procédé de production d'acide citrique est effectuée de manière analogue à la méthode de contrôle, mais on introduit dans le stimulateur milieu constitué de la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l'acide 2-hlorfeniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 1: 10: 1 en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g d'acide citrique. Dans ce procédé, la quantité nécessaire de la mélasse est consommée pendant 144 heures et la concentration finale de l'acide citrique est de 109,5 g / l, ce qui est 12% plus élevée que dans le mode de réalisation de commande, tandis que le temps de traitement est réduit de 14% et le taux moyen d'élimination de l'acide citrique est de 18, 25 kg / m 3 · h, ce qui est 31% plus élevé que la méthode de contrôle.

Exemple 8 Production de la biomasse végétale de ginseng.

Procédé de commande

Biomasse ginseng cultivé Panax Ginseng culture cellules superficielles (culture industrielle Kirov BHZ) sur le milieu solide, la formulation de ce qui correspond à la production de TU 59-112-72 "Biomasse ginseng". La culture est réalisée à une température de 26 + 1 ° C et à un pH de 5,0-6,0 pendant 30-32 jours. Ensuite , on sépare la biomasse du milieu de culture et on le sèche à une température de 50 ± 5 ° C Par ce procédé, le rendement en biomasse sèche de 1 litre de milieu a été de 10 g, la teneur en matières extractibles dans le poids de la plante de 41,2%

La méthode proposée

Dans ce procédé, la culture de Panax ginseng a été cultivée dans les mêmes conditions que dans la méthode d'essai, mais dans un milieu nutritif solide avant l'accumulation d'un mélange de cellules végétales a été introduite N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l'acide 2-hlorfeniloksiuksusnoy, la N-tris ( 2-hydroxyethyl) de sel d'ammonium de l' acide 4-hlorfeniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfenilsulfoniluksusnoy dans le rapport 10: 10: 1, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g de matière végétale. rendement de la biomasse sèche dans ce processus est de 15 g à 1 litre de milieu, la teneur en matières extractibles dans une usine qui est de 46,8% en poids le rendement obtenu par la présente invention de 50% supérieur à celui du procédé de commande, et augmente ainsi la teneur en matières extractibles dans le produit (14%).

Exemple 9 bioconversion de matières premières végétales afin d'obtenir un produit de protéines fourragères.

Procédé de commande

Fig bioconversion soumis qualité inférieure (comme un mélange de farine de grains entiers et balles). Comme biodégradateur utilisant la culture de levure p. Endomycopsis fibuligera (N VKPM Y-2173) ayant la capacité amylolytique. La matière première est soumise à un broyage fin, tamisé à travers un tamis d'un diamètre de trou de 1 mm, on dilue avec de l' eau 1: 8 , on a ajouté de l' acide phosphorique à un pH de 5,5 et on chauffe à une température de 70 ° C, maintenu à cette température pendant 30 minutes, on refroidit, ajoute, en g / l : sulfate d'ammonium 2,0; MOP 0,5; sulfate de magnésium, 0,35; le sulfate de fer (ferreux) 0,05. Dans le milieu de culture E.fibuligera de levure résultant est effectuée pendant 18 heures à 32 ° C, pH 4,5, milieu d'aération à 10 l / lh sans agitation mécanique. A la fin du liquide de traitement séparé de la phase solide, ce dernier est séché. Le résultat est un produit ayant une teneur réelle en protéines de 34,5% à 1 kg 1,23 kg, qui consomment le mélange de céréales.

La méthode proposée

Dans ce procédé, une matière première pour le procédé de bioconversion et préparé le même que dans le processus de contrôle, mais l'appareil, qui est réalisée biodégradation, une solution aqueuse d'un mélange de N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de l'acide 2-hlorfeniloksiuksusnoy, N-tris- (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide 4-hlorfeniltiouksusnoy et de l' acide 4-hlorfenilsulfoniluksusnoy dans un rapport de 10: 01:10, en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g de produit protéique. La culture de biodégradateur en utilisant la même levure que dans le processus de contrôle. processus de croissance des micro - organismes est effectuée à une température de 32 o C, pH 5,5, moyen d'aération 10 l / lh sans agitation mécanique pendant 12 heures. De 1,2 kg 1 kg de produit de grain est obtenu contenant 46% de la protéine vraie

bioconversion d'activation usine de traitement des matières premières par la méthode proposée accélère le processus de 33% augmente la teneur en protéine dans le produit de 33% et de réduire le taux de 2% de charge par rapport aux moyens de commande.

Exemple 10. La culture de variétés de tomates "de remplissage blanc".

Procédé de commande

Dans ce procédé, l'activation de la croissance et la maturation des fruits de tomate est effectuée avec un mélange d'engrais minéraux.

Les graines de la variété de tomate, "remplissage blanc" poussent les plants pendant 60 jours. Ensuite, 10 plants arbustes plantés dans le sol à une distance de 50 cm. Au bout de 7 jours après la plantation, puis tous les 10 jours jusqu'à ce que les ovaires à l'inflorescence dans le sol la fabrication d'engrais inorganiques. Un mélange d'engrais complexe (ammophoska rapport: azote: phosphore: potassium 2: 1: 0,2), sulfate de magnésium, l'acide borique et du molybdate de sodium dans un rapport de 1: 0,07: 0,004: 0,002 a été bien trituré et on agite à 1 kg dispersé de façon uniforme sur la taille de la surface de 2,5 m 2 de terrain occupé par des plants de tomates. Quotidiennement tout au long de cette phase en tant que surface d'engrais uniformément humidifiée avec de l'eau en une quantité de 30 g. Lorsque les ovaires cessent d'engraisser les plantes. arrosage quotidien est réduit de moitié. Après la maturation des fruits ont calculé le montant moyen de la masse de fruits mûrs sur un buisson. Dans ce cas, il est égal à 1,75 kg à pleine maturité des fruits 70 jours temps.

La méthode proposée

La culture des fruits de tomate est effectuée de la même manière que dans la méthode d'essai, mais l'activation de la croissance et de la maturation des variétés de tomates exercice «Remplissage blanc» en outre stimulant la composition. 1 kg d'un mélange de mélange d'engrais minéral, on a ajouté la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium d'acide feniloksiuksusnoy, la N-tris (2-hydroxyéthyl) ammonium, un sel d'acide feniltiouksusnoy et la N-tris (2-hydroxyéthyl) un sel d'ammonium de fenilsulfoniluksusnoy acide rapport 1: 1: 10, respectivement, en une quantité de 1,0 x 10 -10 g / g de masse verte traitée. Le mélange résultant fertiliser le sol ainsi que dans le processus de contrôle. Un tel traitement est effectuée 7 jours après le repiquage des tomates dans le sol, puis tous les 14 jours jusqu'à l'apparition des ovaires dans les inflorescences. Entre 14 jours dans le sol faire d'autres 0,3 kg d'engrais inorganiques ci-dessus (voir. La méthode de contrôle) de la composition.

Dans cette méthode, l'activation complète maturation se produit dans les 60 jours, et la quantité moyenne de poids sur un buisson de fruits représente 3,2 kg, soit la méthode proposée pour activer la croissance et la maturation des fruits de tomate pour accélérer la maturation pendant 10 jours et obtenir les fruits de la récolte d'un buisson à 1,45 kg.

Ainsi, l'activation de divers processus biologiques de la méthode proposée améliore l'efficacité de ces procédés de 5 à 20% en comparaison avec des procédés analogues d'activation, et dans certains cas, et 2-2,5 fois (par exemple, dans le cas des vitamines IOO) et 30- 80% par rapport à des procédés où l'activation est pas appliquée.

REVENDICATIONS

Le procédé d'activation des processus microbiologiques, la croissance des plantes et des cellules végétales, caractérisé en ce que l'activateur est introduit dans le procédé sous forme de mélange des trois composés chimiques appartenant au groupe de sels d'ammonium, l'acide arylacétique de formule générale

C 6 H 4 R 1 .R 2 C 2 H 2 O 2 · NH · C 6 H 15 O 3

dans laquelle R 1 H, Cl, CH 3;

R 2 -O, -S, -SO 2,

dans le rapport 0,1 10,0 10,0 0,1 0,1 10 mélange en une quantité totale de 1 x 10 -10 à 1 x 10 -1 g pour 1 g de la biomasse résultante , ou transformées.

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Date de publication 09.03.2007gg