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invention
Fédération de Russie Patent RU2024871

PROCÉDÉ DE DÉTERMINATION reflux duodénal

PROCÉDÉ DE DÉTERMINATION reflux duodénal

Nom de l'inventeur:. AV Tuev; Golovanov ES. Savina LV
Le nom du titulaire du brevet: Tuev Alexander
Adresse de correspondance:
Date de début du brevet: 01.04.1991

Utilisation: en médecine et en biologie, peuvent être utilisés pour le diagnostic rapide qualitatif du reflux duodénal. RÉSUMÉ: basale et stimulée gouttelettes contenu en volume de 0,01 - 0,03 ml chacun a été appliqué sur une lame de verre, couvrir chaque lamelle, séché à t = 35 - 38 ° C pendant 3 - 6 heures, puis examinées sous lumière polarisée. Et en présence d'inclusions dendritiques optiquement actifs déterminer les préparations reflux duodénal. La méthode est simple et permet d'améliorer la précision de la détermination de la présence de reflux duodénogastrique.

DESCRIPTION DE L'INVENTION

L'invention concerne la biologie et de la médecine et peut être utilisé pour le diagnostic rapide de haute qualité de reflux duodénal (DGR).

procédé connu de détection qualitative et quantitative des acides biliaires dans le contenu gastrique - Méthode CCM (prototype).

Le contenu gastrique obtenus à jeun ou une partie du contenu de base obtenu par l'étude fractionnée est filtrée à travers une gaze pour éliminer le mucus et les touffes de nourriture non digérée, jus ajusté à pH 7,0-8,0 par addition d'une solution saturée de quelques gouttes de carbonate de sodium. A 1 ml du contenu gastrique ainsi préparé verse 5 ml de 96 l' éthanol est agité et chauffé pendant 5 min dans un bain-marie à 80 ° C Après centrifugation (3000 tr / min, 5 min) le surnageant a été décanté dans des tubes avec une large ouverture , ( "tasses" de sucre) et on évapore à sec au bain-marie bouillant. Le précipité a été lavé deux fois avec 5 ml d'éther pour éliminer le cholestérol a été dissous dans 0,2 ml d'alcool pour 96 la réaction qualitative.

Pour la détection qualitative de l'extrait alcoolique de trace à cristaux liquides (10-20 ml) est appliquée sur la plaque chromatographique. Après séchage , les plaques par pulvérisation d'une solution alcoolique à 10% d'exposition de l' acide phosphomolybdique et placé dans un four à 105 ° C , à une concentration suffisamment élevée d'acides gras dans le chromatogramme du contenu gastrique de les identifier comme des taches distinctes. Dans le cas de faibles concentrations - dans la ligne solide [1].

L'inconvénient est la complexité du mode d'exécution de la préparation du matériau et de détection qualitative à cristaux liquides, à savoir sa préparation pour la chromatographie, la perte à savoir la nativité complète du contenu gastrique 96 par l'addition d'alcool éthylique, chauffé pendant 5 min à 80 ° C, l' évaporation à sec un bain d'eau bouillante, le lavage dans l' éther; disponibilité des plaques chromatographiques, qui sont produites à l'étranger.

Tout ce qui précède, il est difficile d'utiliser la méthode chromatographique pour déterminer les acides gras dans le contenu gastrique, et diminue donc la possibilité d'un diagnostic précoce de GHD.

Le but de l'invention - un procédé pour simplifier et améliorer la précision. Ce but est atteint par le fait qu'une étude réalisée échantillon de cristal biréfringent sous la forme du contenu gastrique gouttelettes séchées (partie moyenne de la basale et stimulée contenu) a examiné le patient, suivi par l'étude de son motif optique dans Nicols croisés d'un microscope à polarisation.

Afin de simplifier le processus et d' améliorer la précision des gouttes basale et stimulée par la pentagastrine volume de contenu de 0,01-0,03 ml chacun a été appliqué sur une plaque de verre, recouverte d'une lamelle, puis séché à T = 35-38 ° C pendant 3-6 h , mikroskopiruyut lumière polarisée et en la présence de la préparation d'inclusions dendritiques optiquement actifs enregistrent des changements dans la composition du contenu gastrique.

Le processus est le suivant. Moyenne (2-3) au service de la basale et stimulée (par exemple la pentagastrine) NZHS sous forme de gouttes (3-4), le volume de 0,01-0,03 ml chacune, déposées séparément sur des lames de verre, couvrir chaque lamelle et séché à l'air sec four à T = 35-38 ° C pendant 3-6 heures - pour l'élimination complète de l' humidité.

La préparation obtenue lumière mikroskopiruyut polarisée (par exemple, un microscope polarisant "MIN-8"), et si elle contient un inclusions dendritiques optiquement actifs déterminent la présence LCD, et donc la présence de DGR.

Cristal étude au microscope optique de polarisation a été réalisée (min-8). Avec une teneur élevée de l'écran LCD et NZHS (basal et stimulé secrets) sont présents dans les préparations sous forme dendritique.

Tous les patients ont été étudiés détermination quantitative d'acides gras dans NZHS.

1-6, une méthode consiste à déterminer le reflux duodénogastrique.

Exemple 1. Healthy S., 31 ans, sans antécédents familiaux sur la pathologie gastro-intestinale.

Technologie: l'étude de la sonde du contenu gastrique obtenu 4 portions 4 portions de base et la pentagastrine sécrétion stimulée. Dans la diapositive 3 gouttes causées NZHS troisième partie du volume de la sécrétion basale de 0,01 ml chacun, a été couvert avec des lunettes de couverture et séché dans un four à T = 35 ° C pendant 3 heures, puis mikroskopirovali. Dans l'étude de la drogue dans la surface de la microstructure lumière polarisée séchée NZHS gouttes optiquement inactif, car il n'y a pas d'inclusion active optiquement. On peut voir la structure de branchement (Figure 1). Dans l'étude de la troisième partie du contenu de base de Chromatographie en couche par l'écran LCD ne soit pas déterminé, ce qui indique l'absence de la RDA.

Inflicted sur les glissières 3 gouttes NZHS deuxième partie de la sécrétion stimulée par la pentagastrine, chaque volume de 0,03 ml, recouvert de verre de couverture et séché dans un four à T = 38 ° C pendant 6 heures, puis mikroskopirovali. Dans l'étude des médicaments en surface séchée gouttes microstructure lumière polarisée NZHS pas optiquement actif. mikrotipy visible ramification (figure 2). Dans l'étude des mêmes portions de la sécrétion stimulée par CCM LCD ne sont pas définis, ce qui indique l'absence de la RDA.

composite modèle fabriqué à partir de jeu de LCD standard, la teneur en acide glycocholique qui est de 80 mmol / l. Pour la préparation de 3 gouttes d'une solution d'acide glycocholique de préparation standard, chaque volume de 0,01 ml a été appliqué sur les lames et les lames recouvertes séché 3 heures à T = 35 ° C, puis mikroskopirovali. Dans l'étude du médicament présent dans la lumière polarisée structure dendritique optiquement active (3).

Le second composite modèle fabriqué à partir ensemble de LCD standard, dont le contenu est égale à 40 mmol / l causé un trois gouttes (0,03 ml de volume chacune) sur des lames de verre et recouvert de verre de couverture et séché pendant 6 heures à T = 38 ° C, le médicament mikroskopirovali en lumière polarisée. La formulation contient des inclusions dendritiques optiquement actives (figure 4).

Exemple 2. Patient A., 35 ans. Le diagnostic: ulcère peptique piloroduodenalnoy phase de zone subaiguë de rechute, avec la localisation de l'ulcère dans le bulbe duodénal. duodenostasis fonctionnelle avec la présence de DGR (X-ray et gastroduodenofibroskopicheski).

La technologie 3 gouttes NZHS troisième partie de la sécrétion basale du patient, chaque volume de 0,01 ml a été appliqué sur les lames et recouvertes d' un verre de couverture et séché dans un four à T = 35 ° C pendant 3 heures, puis la lumière mikroskopirovali polarisée. La chute cristallisées inclusions présentes optiquement actives dendritiques (figure 5). Dans l'étude de la portion de base du contenu de la troisième méthode décrite dans le contenu art antérieur LC a augmenté à 31,2 mmol / l, ce qui confirme la présence d'DGR.

Exemple 3. I. patient, âgé de 45 ans. Le diagnostic: gastrite antrale chronique, de type B, avec une sécrétion préservée, la phase d'aggravation. bulboduodenostaz fonctionnelle avec la présence de la RDA.

La technologie 3 gouttes NZHS la sécrétion stimulée par la seconde partie du patient appliquée sur des lames de microscope, chaque volume de 0,03 ml, les verres de couverture couverts, on sèche pendant 6 heures dans un four à T = 38 ° C, puis la lumière polarisée mikroskopirovali. La préparation de optiquement actif dendritique inclusion identifiée indiquant la présence d'un écran LCD, et donc la RDA (figure 6). Dans cette même étude, une partie de la sécrétion gastrique par le procédé décrit dans le contenu art antérieur LC a augmenté à 30,1 mmol / l, ce qui confirme la présence d'DGR.

Efficacité méthode cristallographique de diagnostic GHD, par rapport à l'art antérieur réside dans le fait que, sans procéder à chromatographique et des études biochimiques nécessitant d'importants coûts techniques et matérielles, peuvent être les types de optiquement impuretés actives pour effectuer une analyse qualitative du contenu gastrique et diagnostiquer GHD (bulboduodenostaz sphincter pylorique déficiente de l'estomac ). Le processus est informatif, facile à réaliser. La présence de l'écran LCD est diagnostiquée par la présence de formes optiquement actives dendritiques.

REVENDICATIONS

PROCÉDÉ DE DÉTERMINATION reflux duodéno en identifiant les acides biliaires dans le contenu gastrique in vitro, caractérisé en ce que, afin de simplifier et d'améliorer la précision de la méthode, les gouttes de base et des portions stimulées contenu gastrique indigènes est appliqué à la diapositive, couvrir chaque lamelle et séché 3 - 6 heures dans un four à 35-38 ° C, puis examiné sous lumière polarisée en présence de la préparation d'impuretés optiquement actifs de déterminer la présence d' un reflux duodéno dendritique.

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Date de publication 29.03.2007gg